Esta trilha fica no Canyon Itaimbezinho, no Parque Nacional Aparados da Serra. A caminhada é feita dentro da fenda do Itaimbé e no leito do Rio do Boi. Na trilha pode-se observar a transição da Mata Atlântica e Nebular em seus vários estágios de regeneração. É um passeio muito apreciado e considerado emocionante pelos nativos e visitantes. A trilha do Rio do Boi é uma das poucas trilhas abertas oficialmente no Parque Nacional Aparados da Serra. Além dela estão abertas também a Trilha do Vértice e a do Cotovelo.
É indiscutivelmente uma das mais belas caminhadas realizadas neste Parque em razão de sua inconfundível e peculiar paisagem. É uma trilha impressionante onde é destaque a riqueza da fauna e da flora e de sua fascinante geologia. Pode-se ainda apreciar o despencar das cachoeiras e suas piscinas de águas límpidas e naturais. A trilha inicia no Posto de Fiscalização (a 12 Km do centro) e pode ser percorrida até a Cachoeira Grande. O percurso de ida e volta é de 8.343,10 metros. É considerada de alto grau de dificuldade. A maior parte da caminhada é feita nas pedras que margeiam o rio e cobrem seu leito. Há ainda necessidade constante de atravessar o rio e em alguns pontos a profundidade de água chega a altura dos joelhos. Estas condições exigem certa mobilidade física e condições de adaptação as prováveis dificuldades encontradas pelo visitante referente a estes aspectos. O tempo de caminhada varia de 5 horas a 8 horas, neste tempo estão contadas as paradas para banho e observação e a caminhada de volta. A capacidade de carga desta trilha é de até 12 pessoas, mais o guia.